2.3.2 Специфическая лабораторная диагностика
Рекомендовано пациентам с подозрением на ВГЧ-6-инфекцию проведение молекулярно-биологического исследования различного биологического материала (слюны, сыворотки крови, соскоба эпителиальных клеток ротоглотки и др.) для обнаружения ДНК ВГЧ-6 методом ПЦР (качественный тест, количественный тест) [1,2,5,11, 12,16,17,20,103,104].
Уровень убедительности рекомендаций А (уровень достоверности доказательств – 1).
Комментарии: Выявление ДНК ВГЧ-6 в биоматериалах с помощью полимеразной цепной реакции (ПЦР) является методом выбора. Результаты получают в течение 4–6 часов после представления образца. Несомненную ценность имеет определение количества ДНК ВГЧ-6 методом ПЦР в режиме реального времени, результаты исследования можно использовать как с диагностической целью, так и для оценки эффективности лечения. В настоящее время большинство исследований направлено на количественную оценку вирусной нагрузки. Нагрузка более чем 102,5 копий генома /мкг ДНК при использовании метода ПЦР в режиме реального времени клинически значима. В крови клинически здоровых лиц приблизительно постоянное число инфицированных В-лимфоцитов с латентно протекающей инфекцией 1-50 зараженных клеток на 1 000 000 В-лимфоцитов, вирусная нагрузка – менее 100 копий ДНК на 105 клеток. Особое значение метод ПЦР имеет: при первичном инфицировании в стадии «серологического окна» до начала синтеза антител, когда выявление ДНК ВГЧ-6 в крови является единственным маркером активной репликации вируса; при асимптомном форме ВГЧ-6 инфекции, когда заболевание не имеет явной клинической картины, но патологические процессы присутствуют, и больные, выделяют вирус в окружающую среду. У иммунокомпрометированных больных с эпизодами ВГЧ-6- инфекции в анамнезе и высоким риском реактивации вируса показано проведение молекулярно-генетическое исследование вируса в динамике. На результаты ПЦР - 31 исследований могут влиять: качество взятия клинического материала, условия хранения/транспортировки и сроков обработки материала [1,2,11,12,103, 104]. У пациентов с клиническими симптомами инфекционного мононуклеоза для верификации нозологии возможно проведение реакции Пауля-Буннеля, реакции Гоффа-Бауэра.
Рекомендовано пациентам с подозрением на ВГЧ-6-инфекцию (на амбулаторном этапе по клинико-эпидемиологическим показаниям, в стационаре – всем больным) проведение серологического исследования сыворотки крови с определением антител (АТ) к ВГЧ-6 разных классов (IgM, IgG) методом ИФА [1, 2, 5, 11, 12, 16, 17, 20].
Уровень убедительности рекомендаций С (уровень достоверности доказательств – 5).
Комментарии: Наибольшее диагностическое значение имеет детекция АТ ВГЧ-6 IgM как показателя активности процесса – их выявление свидетельствует об остром заболевании, реинфекции, суперинфекции или реактивации. Однако в клинически выраженных случаях, в т. ч. при типичном течении ИМ-ВГЧ-6, специфические АТ IgM к ВГЧ-6 выявляются редко. Лабораторным критерием, подтверждающим клинический диагноз ВГЧ-6-инфекции, является нарастание титра специфических антител IgG в 4 и более раз в течение 10 - 14 дней (метод парных сывороток). Титры IgG к ВГЧ-6 у серопозитивных лиц варьируют в зависимости от возраста. Максимальные титры отмечаются у детей до 4 лет и в возрастной группе старше 50 лет. Высокий уровень у детей объясняется наличием первичной инфекции, тогда как у пожилых людей связано с возрастзависимой реактивацией инфекции вследствие ослабления клеточного иммунного ответа. Проведение серодиагностики в динамике показано пациентам с атипичной клинической картиной ВГЧ-6-инфекции и отрицательными результатами выявления ДНК вируса молекулярно-биологическими методами исследования и др. Учитывая ограничения серологических анализов у хозяев с ослабленным иммунитетом, серология минимально информативна у реципиентов органов и тканей.
Рекомендовано пациентам с ВГЧ-6-инфекцией по клиническим показаниям при наличии общемозговой или очаговой неврологической симптоматики 32 исследование спинно-мозговой жидкости (ликвора) [1, 2, 5, 11, 12, 14, 16, 17, 95, 96].
Уровень убедительности рекомендаций С (уровень достоверности доказательств – 4).
Комментарии: Исследование ликвора позволяет определить содержание белка, глюкозы, цитоз, а также выявить маркеры ВГЧ-6, определить индекс отношения АТ в сыворотке крови к титру АТ в ликворе (300:1 и более).
Рекомендуется беременным женщинам с симптоматической ВГЧ-6-инфекцией по клиническим показаниям молекулярно-биологическое исследование биологического материала, направленное на обнаружение специфических фрагментов ДНК вируса с использованием тест-систем, разрешенных к медицинскому применению в Российской Федерации (ПЦР: количественный тест), для выявления степени риска вертикальной передачи вируса плоду [1, 2, 5, 16, 17, 14, 25, 103, 104 ].
Уровень убедительности рекомендаций С (уровень достоверности доказательств – 5).
В связи с тем, что ВГЧ-6 не элиминируется из организма хозяина, то контроль излеченности не целесообразен.
Рекомендовано иммунокомпрометированным больным ВГЧ-6-ИМ с низкой эффективностью ПВТ (на фоне приема супрессивной терапии, трансплантации органов и тканей, гематологических заболеваний, ВИЧ-инфекции) или с высоким риском развития активной формы заболевания молекулярно-биологическое исследование, направленное на обнаружение специфических фрагментов ДНК вируса с использованием тест-систем, разрешенных к медицинскому применению в Российской Федерации (ПЦР: количественный тест) с целью оценки активности инфекционного процесса, эффективности проводимой терапии и коррекции терапии [1, 2, 5, 16, 17, 103, 104].
Уровень убедительности рекомендаций С (уровень достоверности доказательств – 5).