2. Диагностика

Для лабораторной микробиологической диагностики CDI следует использовать несколько методов. Алгоритм лабораторной микробиологической диагностики CDI представлен в ФКР. Исследование начинается с определения ГДГ серологическим методом и заканчивается либо выделением токсигенного штамма C. difficile и определением его чувствительности к антибактериальным препаратам, либо отрицательным результатом, при котором возбудитель отсутствует или его этиологическая роль вызывает сомнение.

В зарубежных клинических рекомендациях предлагается комбинировать тесты в двухили трёхэтапном алгоритме диагностики CDI. На первом этапе определяют ГДГ C. difficile. Многими авторами считается, что в случае отрицательного результата дальнейшее обследование больного не требуется, при положительном необходимо проведение тестов, подтверждающих наличие токсинов (ПЦР или ИФА) [28; 54].

Многоэтапная лабораторная микробиологическая диагностика является адекватной стратегией, при которой низкая стоимость скринингового исследования и быстрота его исполнения, а именно определение ГДГ в просветных фекалиях, используется на первом этапе, за которым следует определение токсинов А и В в просветных фекалиях. При наличии диареи и отрицательных тестов на ГДГ и токсины А и В необходимо исключить наличие бинарного токсина. Бинарный токсин детектируется методом ПЦР.

В России по данным Государственного реестра медицинских изделий и организаций (индивидуальных предпринимателей) осуществляющих производство и изготовление медицинских изделий (www.roszdravnadzor.ru/services/misearch), зарегистрировано четыре коммерческих ИФА тест-системы и одна ИХА тест-система для детекции токсинов А и В в фекалиях. Индикация токсигенных штаммов C. difficile продуцирующих бинарный токсин в ЛПУ возможна только с использованием ПЦР тестсистем. Регистрационное удостоверение выдано на единственную ПЦР - систему для анализатора GeneXpert DX, который также разрешён в установленном порядке к применению в РФ и имеет регистрационное удостоверите. Заключительный этап микробиологической диагностики CDI выделение токсигенной культуры и определение её чувствительности к антибактериальным препаратам.

Нецелесообразно проводить повторные лабораторные исследований после курса антибиотикотерапии; при клиническом улучшении серологические реакции остаются положительными на протяжении 30 дней.

При развитии у пациента клинической картины CDI лечение начинается до получения лабораторного подтверждения. Отрицательные результаты лабораторных тестов не исключают наличия возбудителя [19]. Необходимо лабораторное подтверждение и мониторинг за CDI.

Для проведения лабораторной микробиологической диагностики CDI оптимален трёхэтапный алгоритм лабораторного микробиологического исследования, включающий сочетание лабораторных методов для достижения максимально высокой чувствительности и специфичности исследования.

2.4.6. Интерпретация результатов

При детекции ГДГ и токсинов А/В результат исследования - положительный, дальнейшее исследование направлено на выделение C. difficile и определение её чувствительности к антибактериальным препаратам.

При отрицательном результате серологического исследования просветных фекалий на ГДГ необходима постановка ПЦР для верификации отрицательного результата.

Просветные фекалии положительные по ГДГ и отрицательные по наличию токсина А/В продолжают исследоваться на наличие возбудителя.

Просветные фекалии положительные по токсинам и отрицательные по ГДГ исследуются культуральным методом.

При выделении нетоксигенного штамма C. difficile результат расценивается как сомнительный и требует дополнительного подтверждения.

При отсутствии ГДГ, токсинов А/В/бинарного токсина, возбудителя результат - отрицательный.

Оценка методики

Разработанный диагностический алгоритм оценён по следующим параметрам:

• чувствительность
• специфичность
• точность теста
• положительное прогностическое значение
• отрицательное прогностическое значение
• воспроизводимость

В качестве методики сравнения («Золотого стандарта») использовались американские и европейские рекомендации по диагностики CDI.

Проведён анализ результатов исследований изучения 578 образцов просветных фекалий, полученных от пациентов, поступивших в стационар и пациентов с клинической картиной CDI (табл. 2).

Таблица 2

Оценка трёхэтапного алгоритма

Алгоритм характеризуется высокими значениями воспроизводимости результатов исследований, чувствительности и специфичности.

Трёхэтапный алгоритм исследования предназначен для лабораторной диагностики CDI. Использование трёхэтапного алгоритма исследования обеспечит правильную и своевременную диагностику, локальный микробиологический мониторинг и эпидемиологический надзор за CDI.