4. Общие положения

4.7 Лабораторная диагностика

Сбор биологического материала (фекалии, кровь, рвотные массы, промывные воды желудка) для лабораторных исследований осуществляется до начала этиотропного лечения медицинским работником, поставившим первичный диагноз острого кишечного инфекционного заболевания (или при подозрении на него); при групповой и вспышечной заболеваемости – персоналом центров Роспотребнадзора и медицинских организаций.

При лечении больного на дому сбор материала для исследования осуществляется персоналом медицинских организаций, осуществляющих медицинскую помощь в амбулаторных условиях.

От больных, поступающих в стационары для госпитализации, материал для бактериологического исследования забирается в приемном отделении до назначения антимикробной терапии.

Любой нативный материал для лабораторного исследования собирают в стерильную пластиковую или стеклянную посуду. Срок доставки материала в лабораторию должен быть не позднее 2 ч после сбора и сопровождаться направлением. При невозможности своевременной доставки в лабораторию материала должны использоваться консервант или транспортная среда. Материал помещается в холодильник и направляется на исследование не позднее 12 час после сбора. При подозрении на токсикоинфекцию (бактериальное пищевое отравление) помимо материала от больного на исследования поступают остатки пищевого продукта, подозреваемого в качестве фактора передачи возбудителей инфекции.

Применение молекулярно-генетических методов исследования должно рассматриваться не как альтернатива, а как обязательное дополнение к регламентированным схемам диагностики острых кишечных инфекций, позволяющее эффективно выявлять комплекс вирусных возбудителей ОКИ и проводить оценку идентичности бактериальных и вирусных изолятов.

Молекулярно-генетические методы исследования в очагах ОКИ с групповой заболеваемостью применяются для решения следующих задач:

1. наиболее раннего установления этиологии заболеваний с целью своевременного начала адекватной терапии и проведения соответствующих санитарно- противоэпидемических (профилактических) мероприятий;
2. выявления ДНК/РНК возбудителей в предполагаемых факторах передачи и источниках инфицирования;
3. оценки идентичности изолятов возбудителей, выделенных из различных материалов с целью определения источников инфицирования и факторов передачи инфекции.

Применение молекулярно-генетических методов исследования является обязательным в случае исследования материала из очагов ОКИ с групповой заболеваемостью при:

• регистрации в очаге групповой заболеваемости ОКИ летальных исходов от данных заболеваний, в том числе установленной этиологии;
• отсутствии выделения от пациентов (>30% обследованных) безусловных патогенов в сроки, регламентированные действующими нормативно-методическими документами;
• выделении от больных только условно-патогенной флоры в единичных случаях, без достоверно выявленного фактора передачи возбудителя;
• проведении детекции вирусных агентов в материалах из окружающей среды, продуктов питания или лиц - предполагаемых источников инфицирования;
• проведении оценки идентичности изолятов микроорганизмов, выявленных из различных источников и нерезультативном применении при этом комплекса классических микробиологических и серологических методик …..».

По предложению Всемирной Гастроэнтерологической Организации (2008) микробиологическое исследование при инфекционных диареях показано:

• больным с тяжелыми и генерализованными (септическими) формами болезни (обезвоживанием, лихорадкой или с наличием крови в кале),
• при вспышках инфекции,
• при персистирующих диареях.

4.7.1 Методы диагностики

Лабораторная диагностика шигеллеза проводится с использованием микробиологических методов, молекулярно-генетических методов диагностики, методов серологической диагностики. Выделение чистой культуры возбудителя является основным методом лабораторной диагностики.

При шигеллезе материалом для исследований служат фекалии. Для культивирования шигелл используются среды Плоскирева, Левина, МакКонки, дезоксихолатный агар, агар «сальмонелла-шигелла», среда Хектон для энтеробактерий, наиболее эффективен ксилозо- лизин-дезоксихолатный агар. ПЦР для выявления нуклеиновых кислот шигелл/энтероинвазивных эшерихий в кале является высокочувствительным методом. Серологические исследования (РНГА с дизентерийным диагностикумом, ИФА) необходимо проводить в динамике заболевания в парных сыворотках. К экспресс-методам, направленным на выявление антигенов шигелл в фекалиях относятся реакция иммунофлюоресценции, реакция латекс-агглютинации, реакция коаагглютинации.

Из инструментальных методов обследования используется ректороманоскопия при подозрении на хроническое течение шигеллеза, для выявления атипичных форм шигеллеза у взрослых в очаге инфекции. Противопоказанием для проведения ректороманоскопии является острый период болезни и детских возраст.

Примечание: * - Оценка силы рекомендаций в соответствии с рейтинговой схемой.

Наиболее эффективными способами экспресс-диагностики шигеллеза являются методы, направленные на выявление нуклеиновых кислот - полимеразная цепная реакция (ПЦР). Серологическая диагностика (РНГА, ИФА) имеет значение только для эпидемиологических исследований и для определения связи осложнений с перенесенной инфекцией.

Изменения гемограммы при шигеллезе не имеют специфических черт, характеризуются нормальным количеством лейкоцитов или лейкоцитозом у 60-80% больных, для шигеллеза Флекснера характерен резкий сдвиг лейкоцитарной формулы влево. В копроцитограмме количество детрита снижено, обнаруживают большое количество слизи, лейкоциты выявляют в большом количестве и могут определяться эритроциты в значительном количестве.