Глава 7. Основные принципы диагностики ВИЧ-инфекции

Выделение вируса из исследуемого материала от больного является самым достоверным методом. Применение вирусологического метода позволяет изучать изменчивость ВИЧ, получать вирусный материал для создания диагностикумов и вакцин.

Для обнаружения носителя генетической информации вируса (РНК) в исследуемом материале от больного используется метод ПЦР.

Это наиболее чувствительный метод, позволяющий определить вирусные геномы (провирусную ДНК) в одной инфицированной клетке на 5000 неинфицированных.

ПЦР не может быть рекомендована для постановки диагноза ВИЧ-инфекции, так как любые современные методы ее постановки и существующие диагностические тест-системы позволяют определить наличие вирусных частиц при их концентрации не менее 50 копий в 1 мл. Если эта концентрация ниже, результат ПЦР будет отрицательным, в то время как пациент является инфицированным.

В то же время метод ПЦР при выявлении РНК ВИЧ, особенно его количественная оценка, получил широкое распространение при решении вопроса о начале антиретровирусной терапии и оценке ее эффективности.

Однако вирусологические методы из-за сложности выполнения и дороговизны в практическом здравоохранении не нашли широкого применения. Чаще всего они используются в научно-исследовательских институтах по изучению вируса ВИЧ.

Серологические методы, основанные на обнаружении антител к белкам ВИЧ в сыворотке крови пациента, - основные методы лабораторной диагностики ВИЧ-инфекции в практическом здравоохранении.

Антитела к ВИЧ появляются у 90-95% зараженных в течение 3 мес после заражения, у 5-9% - через 6 мес от момента заражения и у 0,5-1% - в более поздние сроки. Наиболее ранний срок обнаружения антител - 2 нед от момента заражения. В терминальной фазе ВИЧ-инфекции (СПИДа), когда нарушена функция антителообразования, количество антител может значительно снижаться вплоть до полного их исчезновения.

Серологическая диагностика ВИЧ-инфекции проводится в 2 этапа:

• на первом этапе проводится выявление суммарного спектра антител против антигенов ВИЧ с помощью твердофазного иммунофер-ментного анализа;

• на втором этапе методом иммуноблоттинга (Western blot) проводится определение антител к отдельным белкам вируса. Положительный результат иммуноблоттинга подтверждает диагноз ВИЧ-инфекции у данного пациента.

Большую сложность составляет диагностика ВИЧ-инфекции у детей, рожденных от ВИЧ-позитивных матерей. Это обусловлено тем, что в сыворотке крови ребенка циркулируют материнские антитела, и, следовательно, обнаружение антител к ВИЧ у детей первого года жизни не является достаточным основанием для постановки диагноза ВИЧ-инфекции.

В период от 9 до 18 мес дети теряют материнские антитела и в случае заражения начинают вырабатывать собственные антитела. В то же время следует учитывать, что заражение ВИЧ в неонатальном периоде может индуцировать гипо- и агаммаглобулинемию, поэтому исчезновение антител не может считаться достаточным основанием для снятия диагноза ВИЧ-инфекции. В связи с этим дети, родившиеся от ВИЧ-позитивных матерей, должны наблюдаться не менее чем 18 мес от рождения. Если за это время у него не обнаружится клинических и лабораторных свидетельств в пользу ВИЧ-инфекции, ребенок снимается с диспансерного наблюдения.

Диагноз «ВИЧ-инфекция» у ребенка, родившегося от ВИЧ-инфицированной матери в ранние сроки (в возрасте до года), может быть установлен в случае, если у него обнаруживаются клинические (развитие оппортунистических заболеваний, особенно в сочетании с лимфаденопатией) и/или лабораторные признаки ВИЧ-инфицирования (обнаружение собственных ВИЧ-антител и ДНК или РНК ВИЧ не менее чем в трех пробах, взятых с интервалом не менее чем 2 мес).