3. Методика оценки адаптационных резервов организма с использованием индекса ДГЭАС/кортизол

3.1. Материал исследования и правила получения биологического образца

Рекомендуется проводить исследование на фоне обычной для пациента физической, эмоциональной и никотиновой нагрузки.

Материалом для проведения исследования служит сыворотка крови. Получение биологического образца проводится путём взятия крови из локтевой вены пациента в одноразовую вакуумную пробирку без наполнителя или с разделительным гелем. Взятие крови осуществляют с 8.00 до 11.00. Допускается доставка биологического образца в лабораторию пневмопочтой.

На результаты анализа может влиять использование для сбора образца пробирок некоторых производителей, причиной этому могут быть: материал, из которого изготовлены пробирки, используемые в них гелевые или другие барьеры, активаторы формирования фибринового сгустка, антикоагулянты. Данная методика валидирована при использовании пробирок «ОМБ». В случае использования иных пробирок следует провести процедуру валидации.

Центрифугирование пробирок с кровью следует проводить только после окончательного формирования фибринового сгустка (для образцов, взятых от получающих антикоагулянтную терапию пациентов, время формирования фибринового сгустка увеличивается). Центрифугирование проводят при 3000 об/мин 10 минут. В случае получения липемических проб рекомендуется проводить ультрацентрифугирование.

Наличие гемолизированных проб может быть следствием неправильного взятия и хранения образца до его поступления в лабораторию, что требует уточнения для верной интерпретации результатов исследования.

Допускается проведение исследования в первичной пробирке в течение двух часов после центрифугирования.

Для проведения отсроченного исследования необходимо в течение двух часов после центрифугирования перенести не менее 500 µL сыворотки в пробирку из стекла или эппендорф из полипропилена.

Хранение и транспортировка биологического образца проводится:

• при комнатной температуре (от 15 до 30°C) не более восьми часов;
• при температуре от 2 до 8°C в течение 48 часов;
• при температуре -20°C или ниже – до двух месяцев. Размораживание проб допустимо только один раз.

​​​​​​​3.2. Методы исследования

Определение концентрации ДГЭАС в сыворотке крови проводится на автоматическом иммунохимическом анализаторе IMMULITE XPi, SIEMENS, методом конкурентного твердофазного хемилюминесцентного иммуно-ферментного анализа с использованием системы реагентов IMMULITE ® DHEA-SO_4, SIEMENS в соответствии с инструкцией производителя. Время проведения исследования составляет 40 мин. Для проведения одного теста используется 5 мкл сыворотки.

Определение концентрации кортизола в сыворотке крови проводится на автоматическом иммунохимическом анализаторе Access 2, Backman Coulter, с использованием системы реагентов Access Cortisol, Backman Coulter методом конкурентного хемилюминесцентного иммуноферментного анализа с использованием парамагнитных частиц в соответствии с инструкцией производителя. Время проведения исследования составляет 30 мин. Для проведения одного теста используется 25 мкл сыворотки.