4. Оценка эффективности применения комбинации карбапенемов, бисфосфонатов и антисептика

4.2. Обоснование использования сочетания карбапенемов с бисфосфонатами как перспективными ингибиторами МБЛ

Нами была создана модельная системапо материалам исследования подано 3 заявки № 2015133469 от 10.08.2015 года на выдачу патента РФ на изобретение «Антимикробная комбинация сочетанного применения карбапенемов и бисфосфонатов в отношении устойчивых к карбапенемам грамотрицательных микроорганизмов», получен патент на изобретение 22618433 «Антимикробная комбинация в отношении устойчивых к карбапенемам грамотрицательных бактерий вида Pseudomonas aeruginosa, продуцирующих металло-β-лактамазу», (авторы А.Г. Афиногенова, Т.М. Ворошилова, Г.Е. Афиногенов). для оценки перспективных ингибиторов МБЛ из числа лекарственных препаратов, разрешенных для применения в клинической практике.

Работу проводили в 3 этапа: 1) моделирование приобретения резистентности к карбапенемам у ранее чувствительных к ним штаммов грамотрицательных микроорганизмов in vitro в присутствии стандартного реактива фермента металло-бета-лактамазы P.aeruginosa рекомбинантной, экспрессированной в E.coli; 2) сравнение эффективности перспективных ингибиторов МБЛ – клодроновой (препарат «Бонефос») и этидроновой (препарат «Ксидифон») кислот в присутствии того же стандартного реактива; 3) оценка способности выявленных ингибиторов усиливать действие карбапенемов в отношении клинических штаммов грамотрицательных микроорганизмов, продуцирующих МБЛ.

Результаты исследования показали возможность моделирования приобретения ранее чувствительными к карбапенемам референс-штаммами грамотрицательных микроорганизмов P.aeruginosa ATCC 27853, A.baumannii

ATCC ВАА-747, K. pneumoniae ATCC 70603 различных уровней резистентности к карбапенемам в присутствии разных доз стандартного реактива фермента МБЛ. При этом показан дозозависимый эффект уровня резистентности грамотрицательных бактерий к карбапенемам от количества стандартного реактива МБЛ. При этом стандартный реактив МБЛ P.aeruginosa приводит к появлению резистентности у других видов грамотрицательных микроорганизмов, ранее чувствительных к карбапенемам.

Полученные результаты позволили в дальнейшем на разработанной модели изучить возможность клодроновой и этидроновой кислот инактивировать МБЛ и повышать эффективность карбапенемов в отношении референс-штаммов грамотрицательных микробов с приобретенной резистентностью, смоделированной с помощью стандартного реактива фермента МБЛ. Выявлена инактивация стандартного реактива фермента МБЛ даже малыми дозами бисфосфонатов.

Клиницистам следует учитывать наличие у пациента ассоциаций грамотрицательных микроорганизмов, когда один из ассоциантов продуцирует МБЛ, тогда применение карбапенемов будет неэффективным даже при условии чувствительности к ним остальных бактерий в этой ассоциации.

Результаты 3-го этапа исследований демонстрируют синергидный эффект сочетанного применения клодроновой или этидроновой кислот и карбапенемов в отношении клинических штаммов P. aeruginosa и A. baumannii с высоким уровнем резистентности к карбапенемам. При этом показано усиление действия меропенема по показателям его минимальной подавляющей концентрации в 8÷512 раз, поэтому можно считать доказанным, что бисфосфонаты способны ингибировать МБЛ резистентных грамотрицательных микроорганизмов in vitro.

4.3. Обоснование местного использования сочетания карбапенемов с бисфосфонатами и антисептиком

В наших исследованиях показана высокая бактерицидная активность антисептика Пронтосан® в отношении как чувствительных к карбпенемам, так и резистентных штаммов грамотрицательных микроорганизмов. Сочетанное применение карбапенемов с суббактерицидными концентрациями антисептика Пронтосан®, Ксидифона и Бонефоса усиливает действие антибиотика в 4÷1024 раза. Данный эффект выявлен у лекарственных препаратов, разрешенных для применения в практике, но в дозах, значительно меньше клинических.

В результате проведенного исследования сочетанного действия карбапенемов, бисфосфонатов и антисептика из группы полигексанидов была изучена возможность использования бисфосфонатов (клодроновой и этидроновой кислот) в качестве ингибитора МБЛ грамотрицательных бактерий, резистентных к карбапенемам [2,3,5]. Применение разработанной антимикробной комбинации позволяет усилить действие карбапенемов и повысить эффективность АБТ пациентов с тяжелыми инфекционными поражениями, вызванными карбапенемрезистентными грамотрицательными микроорганизмами. Использование комбинации карбапенемов с бисфосфонатами, а при местном лечении и с антисептиком Пронтосаном® дало лучшие результаты по сравнению со стандартной схемой терапии при ведении пациентов с ожогами, трофическими язвами, пролежнями, остеомиелитом и сепсисом.