2.3 Лабораторные диагностические исследования
Основным лабораторным методом подтверждения диагноза МПС I является Комплекс исследований для диагностики мукополисахаридоза тип I (который включает в себя определение активности фермента альфа-L-идуронидазы, количественный и качественный анализ ГАГ мочи и молекулярно-генетические исследования гена IDUA). Данные исследования проводятся в специализированных генетических лабораториях.
Рекомендуется определение уровня гликозаминогликанов мочи всем пациентам с клиническими признаками мукополисахаридозов с целью подтверждения диагноза [7, 8, 28].
Комментарий: при количественном анализе (исследование спектра гликозаминогликанов в моче методом тандемной масс-спектрометрии, спектрофотометрии) выявляют суммарное повышение экскреции ГАГ с мочой, повышение экскреции дерматансульфата и гепарансульфата. Уровень ГАГ является возраст-зависимым параметром. Также при легкой форме МПС I концентрация ГАГ в моче может быть лишь незначительно повышена. Исследование проводится в динамическом наблюдении пациентам, получающим ферментную заместительную терапию с частотой не реже 1 раза в 6 месяцев, пациентам, не получающим ферментную заместительную терапию — не реже 1 раза в год.
Рекомендуется определение активности альфа-L-идуронидазы в процессе мультиплексного определения активности лизосомных ферментов (бета-D-глюкозидаза, альфа-D-глюкозидаза, альфа-L-идуронидаза, сфингомиелиназа, галактоцереброзидаза, альфа-галактозидаза А) в пятнах высушенной крови методом тандемной масс-спектрометрии (комплекс исследований для диагностики мукополисахаридоза тип I) всем пациентам с клиническими признаками мукополисахаридозов с целью подтверждения диагноза [2, 8].
Комментарии: при определении активности альфа-L-идуронидазы в пятнах высушенной крови у пациентов с МПС I типа определяется снижение активности альфа-L-идуронидазы. Этот показатель является основным лабораторным критерием МПС I типа. Так же возможно проводить определение активности альфа-L-идуронидазы в культуре фибробластов, лейкоцитах периферической крови, изолированных лейкоцитах.
Рекомендуется определение мутаций в гене IDUA в крови методом секвенирования по Сенгеру всем пациентам со сниженной активностью фермента альфа-L-идуронидазы с целью подтверждения диагноза на молекулярно-генетическом уровне [9, 10].
Комментарии: тест необходим для верификации диагноза на молекулярно-генетическом уровне. Выявление патогенного/вероятно патогенного варианта нуклеотидной последовательности (ВНП) в гене IDUA делает возможным обследование родственников пробанда, а также проведение пренатальной и преимплантационной диагностики. Большинство ВНП у пациентов с МПС I могут быть выявлены с помощью секвенирования по Сэнгеру всех экзонов и прилегающих к ним участков интронов гена, но в небольшом проценте случаев стандартных методов диагностики может быть недостаточно для выявления причины болезни.
Рекомендуется проведение анализа крови биохимического общетерапевтического пациентам с клиническими признаками МПС I с целью определения функционального состояния печени, которая является одним из органов-мишеней при МПС [5,44,45].
Комментарии: при проведении анализа крови биохимического общетерапевтического возможно определение активности аспартатаминотрансферазы, аланинаминотрансферазы, лактатдегидрогеназы, щелочной фосфатазы, гамма-глютамилтрансферазы в крови, исследование уровня общего билирубина, билирубина связанного (конъюгированного), холестерина, триглицеридов, альбумина, глюкозы, креатинина, общего белка, натрия, калия, общего кальция в крови.
Рекомендуется проведение общего (клинического) анализа крови пациентам с клиническими признаками МПС I в процессе постановки диагноза с целью оценки основных параметров кроветворения и выявления возможных инфекционных процессов [27, 30, 31].
Комментарии: проводят исследование уровня общего гемоглобина, эритроцитов, лейкоцитов, тромбоцитов в крови, оценка гематокрита, исследование скорости оседания эритроцитов, дифференцированный подсчет лейкоцитов (лейкоцитарная формула). В связи с высоким риском развития интеркуррентных инфекций, аспирационной пневмонии у пациентов с МПС рекомендуется проведение данного исследования не реже 1-2 раз в год.